羟甲唑啉是含有咪唑啉基团的一种药物,常用于滴眼液或滴鼻液中,产生血管收缩的作用。当口服或过量使用时,会产生严重的镇静、昏睡、心动过缓、中枢神经抑制等副作用[1],近年来逐渐被犯罪分子用于抢劫或强奸案件中[2]。本研究建立了尿液中羟甲唑啉的高灵敏度LC-MS/MS检测方法,可以满足实际案件的需要。样品前处理采用固相萃取法,使用HLB萃取柱。取1m L尿液,加入1mL pH6的磷酸盐缓冲液,混旋1分钟,高速离心后取上清液待过柱;用2m L 5%甲醇-水淋洗;用1mL甲醇洗脱,收集洗脱液;在50℃下浓缩至干,残留物用200μL甲醇溶解,供LC-MS/MS分析。采用Aglient Zorbax Eclipse Plus C18色谱柱,甲醇和0.1%甲酸水溶液为流动相,流速为0.4m L/min;质谱采用电ESI离子源;MRM扫描模式,定性离子对为245.4->189.0,245.4->145.0;定量离子对为245.4->189.0。所建方法的线性范围为0.5-100ng/mL,LOD为0.1ng/mL.方法的回收率为88.6%,RSD为5.1%。该方法灵敏度高、稳定性和准确性好,可成功应用于实际样品中羟甲唑啉的分析。选取一健康成年女性为志愿者,在其左右眼各滴入两滴盐酸羟甲唑啉滴眼液,在给药1小时、3小时、6小时后分别收集尿液,可从中成功检出羟甲唑啉(见图1),浓度分别为2.7ng/mL、6.0ng/mL和0.8 ng/mL。