HLA分子与三氯乙烯药疹样皮炎发病的关系

来源 :中国毒理学会第六届全国毒理学大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:peterqiu123
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  目的 从HLA功能入手,探索HLA-B*13:01等位基因与三氯乙烯(TCE)药疹样皮炎关联的分子机制.方法 分别构建表达HLA-B*13:01和HLA-B*13:02的Hmy2.C1R细胞系,采用免疫亲和层析法并结合分子筛技术分离HLA-B*13:01和HLA-B*13: 02分子结合的抗原肽混合物,利用反相高效液相色谱-质谱技术分离并测定抗原肽的一级结构,分析特定HLA分子结合抗原肽的共同基序.通过流式细胞技术检测抗原肽与HLA分子的结合力.结果 通过分析抗原肽每个位点氨基酸出现的频率,发现在HLA-B*13:01抗原肽中,P2位锚定氨基酸为亮氨酸(L)和谷氨酰胺(Q),频率分别为39%和33%;PΩ位锚定氨基酸为L(35%),苯丙氨酸(F)、异亮氨酸(I)(15%)和色氨酸(W)(1 1%).HLA-B*13:02抗原肽中,P2位锚定氨基酸为Q(26%)和L(16%);PΩ位为L(26%)、缬氨酸(Ⅴ)(21%)和I(14%).通过HLA-抗原肽结合力试验发现,在HLA-B*13:01抗原肽中,RQDDPSYRSF(Q-F,即P2位为Q,PΩ位为F,下同)、AGDGTFQKW(G-W)、ALLNLAERL (L-L)与HLA-B*13:01结合力较高,结合力分别为54%,50%和45%;在TCE存在的条件下,Q-F和G-W等抗原肽与HLA-B*13:01的结合力分别由54%和50%下降为11%和32%,降低值分别为43%和18%.在HLA-B*13:02抗原肽中,KLKGEENTV(L-V)的结合力最高,达到73%,但是TCE对抗原肽与HLA-B*13: 02的结合力并不产生影响.结论 (1)HLA-B* 13:01与HLA-B*13:02提呈抗原肽的差别主要在于抗原肽的PΩ位氨基酸,而该位点氨基酸主要结合于HLA-B分子的F口袋,提示TCE药疹样皮炎的发生与HLA-B*13:01F口袋的结构特异性有关;(2)TCE可以影响某些抗原肽与HLA-B*13:01的结合,而不改变抗原肽与HLA-B*13: 02的结合,这与HLA-B*13:02基因与TCE药疹样皮炎无关联的结果相吻合.TCE可以使HLA-B*13:01对所结合的抗原肽的偏好发生改变,通过提呈致病性抗原肽,进一步引起机体免疫应答.
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