杨树花发育关键基因的RNAi、DNM载体转化毛白杨的研究

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毛白杨(Populus tomentosa Carr.)是优良的绿化和用材树种,但是毛白杨雌株花期产生大量飞絮,给生产生活带来诸多不便。LFY是花分生组织特征基因,控制花启动,毛果杨PTLF(P.trichocarpa)在花序中表达量最高;AP1既为花分生组织特征基因,同时又控制花萼和花瓣的发育,PTAP1在美洲山杨(P.tremuloides)花发育初期的形成层中开始表达,并在以后的发育过程中继续表达;PTAG1/2基因为花器官特异性基因,它们在毛果杨雄蕊和心皮内表达。为抑制毛白杨开花,解决飞絮污染环境的问题,本研究利用农杆菌介导的叶盘转化法将这些杨树花发育关键基因的RNAi载体PTAG-IR、PTAP1-IR、PTAP1:PTAG-IR、PTLF:PTAG-IR,以及dominant negative mutation(DNM)载体En35S::AP1-M2::E9s转化毛白杨雌性无性系TC1521。经PCR检测,转基因毛白杨阳性株系数目分别为PTAG-IR5株,PTAP1-IR 4株,PTAP1:PTAG-IR6株,PTLF:PTAG-IR 7株,En35S::AP1-M2::E9 7株。转基因毛白杨移栽后的苗期观察发现,PTAG-IR,PTAP1:PTAG-IR,PTLF:PTAG-IR的转基因株系高度低于野生型对照,而PTAP1-IR转基因毛白杨高度与野生型接近。
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