研究背景:最近我们研究发现:Cy5.5和G250共修饰的血清白蛋白纳米粒子(CMGNPs)在癌症治疗方面具有独特的优势,包括优异的光热性能,肿瘤细胞选择性细胞毒性,直接可视化和良好的生物相容性[1]。然而对生物个体而言,CMGNPs对免疫系统的影响仍然是未知的,因此需要进一步的了解其对免疫系统的作用。巨噬细胞在免疫系统中起着举足轻重的作用,在本研究中,我们将具体研究CMGNPs对巨噬细胞的影响。研究目的 :本研究以小鼠巨噬细胞RAW264.7为研究对象,明确纳米材料CMGNPs对RAW264.7细胞形态和功能的影响。研究方法 :(1)通过荧光显微镜观查CMGNPs对RAW264.7细胞形态的影响;(2)通过CCK8试剂盒检测CMGNPs对RAW264.7细胞增殖能力的影响;(3)通过Annexin-V FITC凋亡试剂盒检测CMGNPs影响RAW264.7细胞凋亡的程度;(4)通过流式细胞仪检测CMGNPs处理后RAW264.7细胞吞噬FITC-Dextran的荧光强度,了解CMGNPs对RAW264.7细胞吞噬能力的影响;(5)通过检测处理后细胞因子表达水平的改变,明确RAW264.7细胞的极化方向;(6)通过预先孵育Toll样受体4(TLR4)抑制剂,来判断CMGNPs诱导RAW264.7细胞极化的信号通路。研究结果 :体外实验清楚地表明,CMGNPs不仅增强RAW 264.7细胞的吞噬能力而且还显著的提高了TNF-α等炎性细胞因子的表达,诱导巨噬细胞M1极化。这种诱导M1极化的能力将有利于CMGNPs获得更好的抗癌效果。此外,在添加Toll样受体4(TLR4)抑制剂CLI095后,可消除由CMGNPs触发的巨噬细胞M1的极化,表明TLR4参与CMGNPs诱导的巨噬细胞的极化。研究结论 :CMGNPs可有效激活巨噬细胞,这一作用将有可能进一步增强其抗肿瘤的能力。