莪术醇调控AktJNKNF-kB介导的MMP-9信号通路抑制乳腺癌细胞迁移与侵袭能力研究

来源 :第八届全国临床中药学学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yongren803
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  目的:阐明莪术醇在乳腺癌细胞系体外迁移的作用,并初步探讨其机制,为乳腺癌的治疗提供新的理论依据.方法:利用SRB法和免疫印迹方法分别检测检测细胞活性和蛋白表达.明胶酶谱法检测MMP-2/9酶的活性.Ibidi划痕实验transwell小室实验评价细胞体外的迁移能力.Transwell侵袭实验评价细胞侵袭能力.黏附实验评价细胞黏附能力.RT-PCR检测MMP-2、MMP-9的mRNA水平.结果:SRB法结果显示当莪术醇浓度小于40 μg/ml时4T1和MDA-MB-231细胞活力不受影响.本文选用浓度为10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml.Transwell迁移实验Ibdi划痕实验结果表明莪术醇处理MDA-MB-231细胞8小时后,其体外迁移能力显著降低.Transwell侵袭实验表明莪术醇能够抑制细胞的侵袭能力.黏附实验结果显示莪术醇能明显降低细胞黏附能力.明胶酶谱结果显示莪术醇作用MDA-MB-231细胞24h后,MMP-2、MMP-9酶活性降低.RT-PCR实验结果表明MMP-2、MMP-9在mRNA水平上表达降低.Western blot分析显示莪术醇处理MDA-MB-231细胞后,JNK1/2、AKT和NF-kb的磷酸化水平以及MMP-9蛋白呈浓度依赖性降低.JNK抑制剂SP600125,AKT抑制剂LY294002,NF-kb抑制剂PDTC均能明显抑制细胞MMP-9蛋白表达,与莪术醇合用有协同作用抑制迁移侵袭黏附作用.结论:莪术醇具有抑制乳腺癌细胞体外迁移、侵袭与黏附的能力,其调控机制依赖于JNK/Akt/NF-kb介导的MMP-9信号转导通路.
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