牙龈卟啉单胞菌脂多糖及CD40L对小鼠B10细胞影响的体外研究

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目的:B10细胞是一类通过表达IL-10达到免疫调节作用的调节性B细胞。Toll样受体信号和共刺激分子在固有免疫和获得性免疫中对B10细胞功能和活性的影响仍不清楚。本研究的目的是探讨牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g LpS)及CD40L对小鼠B10细胞增殖以及IL-10表达的作用。方法:使用4%多聚甲醛固定的P.g菌腹腔注射免疫野生型C57BL/6J小鼠后分离其脾脏B细胞。在固定过的P.g菌存在或不存在的条件下分别加入CD40L或CD40L+P.g LpS培养48小时后使用流式细胞仪检测B10细胞数目,并分别使用RT-PCR和ELISA法检测IL-10 mRNA和上清液中IL-10蛋白的表达水平。分离未免疫小鼠的脾脏B细胞进行相同培养和检测。B细胞不加入任何刺激物培养作为对照。结果:CD40L可以同时使免疫和未免疫小鼠的B10细胞增殖、IL-10 mRNA及IL-10蛋白表达水平升高。P.g LpS可使CD40L促进B10细胞增殖的作用增强,但仅在未免疫小鼠中使CD40L促进IL-10 mRNA及IL-10蛋白表达水平升高的作用增强。结论:P.g LpS可以在固有免疫,而非获得性免疫中增强CD40L体外诱导小鼠B10细胞IL-10的表达。
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