Rho抑制剂促进脊髓损伤小鼠脊髓轴突再生的研究

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目的观察使用Rho抑制剂对脊髓损伤后小鼠轴突再生和神经功能恢复的作用。方法92只昆明小鼠做脊髓半切模型,分为4组,分别为对照组(20只)、Fasudil干预组(24只)、Y27632干预组(24只)和胞外酶C3干预组(24只)。手术建立脊髓半切模型后,分别在损伤局部使用纤维蛋白凝胶给药系统持续给予生理盐水和三种不同的Rho抑制剂Fasudil、Y27632、胞外酶C3,术后1周、2周、3周、4周处死,取损伤节段下游脊髓做冰冻切片,免疫组织化学方法观察GAP43蛋白表达变化,术后第1天,3天,7天,14天,21天,28天使用BBB评分法评估下肢运动功能。结果GAP-43免疫组织化学结果显示,在损伤后脊髓内,脊髓前角细胞内以及白质中均出现大量的黄染区域(图1),GAP-43的平均光密度值在4个时间点上有逐渐增高的趋势,三个实验组的平均光密度值均高于对照组,使用Rock抑制剂的Y27632组与fasudil组的平均光密度值低于使用Rho抑制剂的胞外酶C3组。小鼠手术后运动评分,实验组的小鼠BBB评分在损伤后1周内升高最快,使用Rock抑制剂的Y27632组与fasudil组的BBB评分高于Rho抑制剂的胞外酶C3组,从第2~4周四个小组小鼠BBB运动评分升高变缓,至第四周,四个小组的BBB评分无统计学差别。结论Rho抑制剂在脊髓损伤恢复的过程中起到了加速运动功能恢复的作用,可能通过促进轴突再生及保护细胞、减轻其继发性损伤达到促进脊髓损伤恢复的作用。
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