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目的：克隆鸡致病性肺炎克雷伯菌Ⅲ型菌毛结构基因A片段并构建其原核表达系统。
方法：用PCR法从鸡致病性肺炎克雷伯菌Kpn7株基因组扩增mrkA片段并克隆至pMD18-T simple载体，酶切后，亚克隆至表达载体pGEX-4T-1载体，构建重组表达质粒pGEX-4T-A，并转化大肠杆菌，IPTG诱导表达。表达产物经Glutathione sepharose-4B纯化，并用EILSA鉴定。
结果:MrkA蛋白浓度达到1.92mg/mL，表达产物经纯华后，纯度大于90％。经ELISA检测，表达产物与兔多抗血清发生特异性反应。
结论:已成功构建重组表达载体pGEX-4T-A，并在表达菌BL21中可见GST融合表达，并纯化出该融合蛋白，为进一步研究其功能获得了候选蛋白分子。