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目的：建立人胎盘灌流液中奥司他韦和羧酸奥司他韦的高效液相色谱,串联质谱(HPLC-MS/MS)测定方法.方法：以甲硝唑为内标,胎盘灌流液样品经沉淀蛋白处理,采用液质联用法测定.色谱柱为shim-pack XR-ODSⅡ柱(2.2 μm,2.0×75 mm)；0.1％甲酸-0.1％甲酸乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 ml·min-1；采用电喷雾电离源,正离子多离子反应监测(MRM),奥司他韦和羧酸奥司他韦定量离子对分别为m/z313.0/166.1和285.1/197.1.结果：奥司他韦和羧酸奥司他韦分别在0.41～100 ng·mL-1、4.1～1000 ng·mL-1范围内线性关系良好,平均方法回收率89.3％～ 104.7％,日内及日间RSD均小于15％,稳定性考察结果良好.结论：本方法可用于人胎盘灌流液中奥司他韦和羧酸奥司他韦浓度的检测.