目的 采用组织块法体外培养成年兔肌腱细胞并鉴定,探讨其最佳培养方法,并对所培养肌腱细胞的生物学特性进行观察。方法 无菌条件下取兔后腿两个跟腱,并剥离、去除腱鞘,用无菌的PBS反复冲洗肌腱组织,将肌腱组织放入平皿内剪碎,离心、震荡、消化,再1500rpm离心,去上清后将消化好的组织块转移到培养瓶中放入培养箱培养,使其贴壁,4h后加入2ml培养液,当细胞游出贴壁生长后,再加5ml培养液继续培养,此后每3天换一次液,当细胞长到80-90％融合时按1∶2传代。对所培养肌腱细胞进行形态学观察,通过免疫荧光法对所培养的细胞Ⅰ型和Ⅲ胶原蛋白的表达检测进行鉴定,并绘制传代后细胞的生长曲线。结果 所培养肌腱细胞未贴壁时呈圆形,10天左右贴壁生长后形态呈梭形,为成纤维细胞样；从生长曲线可看出,细胞生长倍增时间为6天左右,第7天达高峰,以后进入平台期；免疫荧光染色证实Ⅰ型胶原在细胞中大量表达,而Ⅲ型胶原在细胞中几乎无表达。结论 采用组织块法可在体外成功培养成年兔肌腱细胞。