五种蚜虫类害虫的COI基因检测技术

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准确评估天敌的控害能力是进行生物防治的重要基础。近年来,DNA标记检测技术日趋成熟,为研究自然环境下天敌对害虫的控害作用提供新的契机。本试验针对华北农田生态系统中五种常见的蚜虫类害虫——棉蚜(Aphis gossypii Glover)、麦二叉蚜(Schizhis graninum Rondni)、麦长管蚜(Macrosiphum avenae Fabricius)、禾谷缢管蚜(Rhopaissipum padi L.)、花生蚜(却his craccivora Koch),逐一设计了COI基因特异扩增引物各一对,扩增大小分别为278bp、247bp、248bp、206bp、295bp。5种蚜虫的特异性引物如下:棉蚜:Primer F:5′-TCAGTAGACTTAACTATTTTTTC C-3′Primer R:5′-AAATGTTGATAAAGAATAGGG-3′麦二叉蚜:Primer F:5′-CATTTAGCAGGAATCTCC-3′Primer R:5′-GTTGATAAAGAATTGGATCA-3′禾谷缢管蚜:Primer F:5′-CAGGTATAATTGGTTCATCC-3′Primer R:5′-TCTAATATTATTTAATC GTGGG3′麦长管蚜:Primer F:5′-TTGGATCATCACTTAGAATTC-3′Primer R:5′-TATTATTAATGATGGTGGTAATAG-3′花生蚜:Primer F:5′-TTGTTACAATTCATGCTTTC-3′Primer R:5′-ATACCTGCTAAATGAAGAGAG-3′以各种蚜虫线粒体DNA为模板,以同域的59种其他昆虫为对照进行Species-Specific-COI PCR扩增。发现,仅目标蚜虫能扩增出了目的条带,在其他供试昆虫中均无扩增产物。这说明筛选到的5种蚜虫的扩增引物特异性强,今后可用于评估不同种类天敌对这些蚜虫的控害作用以及同种天敌对不同蚜虫的选择性捕食作用等。
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