抗鸡传染性贫血VP3蛋白单克隆抗体的制备

来源 :中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dingjk3883085
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鸡传染性贫血(Chicken infectious anemia,CIA)是由鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)引起,以再生障碍性贫血和全身淋巴组织萎缩为主要特征的一种免疫抑制疾病.CIAV属圆环病毒科,圆环病毒属,基因组全长2.3kb左右,有3个部分或完全重叠的开放阅读框,分别编码VP1(51.6 kDa)、VP2(24 kDa)和VP3(13.6 kDa)三种蛋.VP1为病毒的唯一衣壳蛋白,也是主要的免疫原蛋白,与VP2蛋白共同作用可诱导产生较高的中和抗体;VP2为CIAV的非结构蛋白,可能作为一个分子伴侣参与病毒VP1空间构象的形成,最近发现VP2具有蛋白磷酸酶活性,但其在病毒感染中具体生物学功能尚不清楚;VP3是功能蛋白,和VP2的开放阅读框互相重叠,其编码基因全长366bp,在各毒株之间同源性较高(>95%).VP3是CIAV的致病因子,是病毒复制必需蛋白.VP3又称为细胞凋亡素(apoptin),它是一种很强的凋亡诱导剂,能诱导鸡胸腺细胞、成淋巴样细胞系、多种人恶性成淋巴样细胞系和人骨髓瘤细胞的凋亡,所以VP3作为一种潜在的抗肿瘤侯选药物,在恶性肿瘤细胞的控制治疗中也具有研究价值. 本试验在获得CIAV VP3蛋白的基础上,通过淋巴细胞杂交瘤技术制备了三株高效价的单克隆抗体,均具有良好的特异性,为进一步研究VP3的生物学特性及CIAV监测、诊断方法打下了基础.
其他文献
2006年5月份,豫北××县养鸡场在刚开产的160日龄蛋鸡群中出现一种以呼噜、拉绿色稀粪,开始少数鸡突然死亡,而后死亡率逐渐增加的一种传染病.经流行病学调查、症状分析、剖检观察、实验室诊断,最后诊断为禽霍乱和鸡新城疫混合感染.本文对诊治情况进行了报告。
本研究采用新城疫病毒(NDV)Lasota株感染鸡胚尿囊液毒和多杀性巴氏杆菌(禽A型)接种固体培养基收获菌液,经灭活后制备成5批油乳剂灭活苗(批号2001-4~5),用于免疫2月龄以上青年鸡,试验分一次免疫组和二次免疫组,分别在免疫后2个月、4个月、6个月、8个月进行ND和FC强毒攻击保护试验,试验证明:相同剂量分二次免疫,近期效果差异不明显,一次免疫组6个月攻毒,ND保护100%、FC保护80%
本文报道1998年~2002年湖北省部分地区雏鸭传染性浆膜炎发病情况,共调查14例,48760只发病鸭群,调查结果表明,雏鸭5~50日龄发病、死亡9320只,死亡率为19.1%(死亡率5~50%),从14例病死鸭脑、肝实质器官中,分离到9株里默氏杆菌,6株大肠杆菌和5株链球菌,证明雏鸭浆膜炎普遍存在混合感染,应用分离株制备鸭浆膜炎,大肠杆菌二联灭活菌免疫10万只雏鸭,获得好的效果.
本研究对来自广东、福建等地区疑似鸭疫里默氏杆菌病的病鸭组织进行了病原菌的初步分离与鉴定,得到20株鸭疫里默氏杆菌.生化试验表明该菌一般不分解碳水化合物,不产生H2S,吲哚试验、甲基红试验、V-P试验均为阴性,不水解淀粉,不利用柠檬酸盐,少数菌株发酵葡萄糖、果糖、甘露糖等,产酸不产气;药敏试验表明大部分菌株对头孢噻吩、头孢拉啶等头孢类药物比较敏感,对常规使用的药物如复方新诺明等均产生耐药性.
本研究用自行分离和鉴定的鸭大肠杆菌地方致病菌株按适当的比例制备细菌悬液,灭活后加入佐剂,制备鸭大肠杆菌多价灭活苗.免疫接种雏鸭10 d后已产生较好免疫,14 d免疫力已很坚强;接种21 d后的攻毒保护率为96.67%(29/30).田间应用:在宜良县8个鸭场及周边地区,先后免疫接种36.4万只雏鸭,对鸭大肠杆菌病的保护率平均达97.36%,商品肉鸭出栏率由83.44%提高到94.86%,收到明显的
来自现场发病肉鸡的196株大肠杆菌对12种常用药物的耐药率调查结果显示,丁胺卡那药物表现出最好的药敏试验效果,其次是头孢类和新霉素类药物,林可霉素和阿莫西林类药物的单方制剂对大肠杆菌表现出较高的耐药率,来自6、7、8三个炎热月份的大肠杆菌对12种药物中大多数药物产生较高的耐药率,说明大肠杆菌耐药性具有季节性.
近些年来,鸡大肠杆菌病比以前复杂得多,如混合感染严重,传播途径和诱发因素增多等.鸡大肠杆菌病的复杂情况对疾病防治提出了严峻挑战.本文就鸡大肠杆菌病的防治情况作一简述.
本研究通过方阵法对间接ELISA抗原、抗体工作浓度进行筛选,再运用正交试验对不同的包被液、封闭液、底物进行比较和选择,最后,再对酶进行了选择,从而选出了运用ELISA法测定小鹅瘟抗体理想的工作条件.即抗原最佳浓度为37.00 μg/ml,血清最佳稀释倍数为1:200.包被液为0.1mol/1碳酸盐缓冲液,经过4℃包被12小时包被,封闭液为10%犊牛血清的PBS溶液,使用羊抗兔Ig-G酶标二抗,底物
本文以病原菌分离、血清型鉴定及本动物致病性试验对流行于辽宁省致病性禽大肠埃希氏菌的血清型分布、致病性以及用蜂胶苗防治该病进行了研究.2001至2005年从14市县的病死禽和死胚中分离出大肠杆菌226株.定型105株,其中O78型占29.52%(31/105),O109型占10.48%(11/105).结果表明O78、O108血清型是流行于本省致病性禽大肠埃希氏菌的绝对优势血清型.随机取优势血清型的
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