【摘 要】
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目的：观察LSD1基因对人类急性T淋巴母细胞性白血病Molt-4细胞增殖和凋亡的影响.方法：设计并筛选出针对LSD1基因的最佳siRNA片段,将其转染入Molt-4细胞后,MTS法观察LSD1siRNA对MOLT-4细胞增殖的影响;流式细胞术分析细胞凋亡;Western blot检测LSD1siRNA作用后组蛋白H3K4、H3K9甲基化及组蛋白H3乙酰化状态,以及P15、DNA甲基化酶1(DNMT
【机 构】
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福建医科大学附属漳州市医院药学部,福建漳州363000 福建医科大学药学院,福建福州350004
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目的：观察LSD1基因对人类急性T淋巴母细胞性白血病Molt-4细胞增殖和凋亡的影响.
方法：设计并筛选出针对LSD1基因的最佳siRNA片段,将其转染入Molt-4细胞后,MTS法观察LSD1siRNA对MOLT-4细胞增殖的影响;流式细胞术分析细胞凋亡;Western blot检测LSD1siRNA作用后组蛋白H3K4、H3K9甲基化及组蛋白H3乙酰化状态,以及P15、DNA甲基化酶1(DNMT1)和凋亡相关蛋白Bcl-2、procaspase-3的表达变化.
结果：沉默LSD1基因可抑制细胞增殖,LSD1siRNA浓度为0、30、60、120nmol·L-1作用48h后,MOLT-4细胞的增殖率分别为(99.65±1.21)％,(83.02±1.69)％,(65.72±2.16)％,(41.15±2.23)％,差异具有统计学显著意义(P＜0.05);LSD1siRNA以60nmol·L-1的浓度转染细胞0、24、48、72小时,增殖率分别为(99.86±1.35)％,(65.72±2.16)％,(48.26±1.92)％,(37.86±1.66)％,P＜0.05,提示LSD1siRNA可以抑制MOLT-4细胞的增殖.LSD1siRNA0、30、60、120nmol·L-1作用48小时后,细胞凋亡率分别为(3.35±1.26)％、(12.16±1.74)％、(32.74±2.47)％、(54.64±2.58)％,(P＜0.05),凋亡率随着LSD1siRNA浓度的增加逐渐上升;同时出现凋亡相关蛋白Bcl-2、procaspase-3的表达下降;LSD1siRNA抑制LSD1蛋白及LSD1mRNA,上调组蛋白H3K4一甲基化、二甲基化及组蛋白H3的乙酰化水平,H3K4三甲基化、H3K9甲基化水平无显著变化;LSD1siRNA下调DNA去甲基化酶DNMT1的表达,上调P15的表达.
结论：LSD1siRNA能抑制MOLT-4细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制可能与表观遗传学调控有关,有望成为白血病治疗的一个新的靶点.
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