【摘 要】
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反向遗传技术是近几年快速发展的一项新技术,在应用于流感病毒及其他分节段的负链RNA病毒方面取得了极大的成就.禽流感(avian influenza,AI)是由A型流感病毒(influenza virus,Ⅳ)引起的烈性呼吸道疾病,被世界动物卫生组织(OIE)定为A类传染病,禽流感不仅给世界养禽业造成了巨大的经济损失,而且严重威胁着人类生命安全,禽流感的防控成了目前研究的焦点.本文就反向遗传技术在研
【机 构】
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湖南畜牧兽医研究所,中国,长沙,410131 湖南师范大学生命科学学院,中国,长沙,410081
【出 处】
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中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会
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反向遗传技术是近几年快速发展的一项新技术,在应用于流感病毒及其他分节段的负链RNA病毒方面取得了极大的成就.禽流感(avian influenza,AI)是由A型流感病毒(influenza virus,Ⅳ)引起的烈性呼吸道疾病,被世界动物卫生组织(OIE)定为A类传染病,禽流感不仅给世界养禽业造成了巨大的经济损失,而且严重威胁着人类生命安全,禽流感的防控成了目前研究的焦点.本文就反向遗传技术在研究禽流感病毒中的应用做探讨,主要从禽流感病毒的基因结构与功能关系、抗原性变异的分子生物学基础、构建新型禽流感疫苗等方面的研究进展进行综述.
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为了解两株鸭源禽流感病毒(DKHNSN1.04和DKHNWLY1.05)的分子生物学特性,本研究对其HA基因进行了序列分析与同源性比较.结果表明,两毒株在其HA裂解位点附近有连续5个碱性氨基酸的插入,表明其存在有高致病力的分子基础.从GeneBank中挑选出15个参考毒株进行比较,发现这两株毒株与国外毒株同源性差,HA基因核苷酸和氨基酸同源率不超过96.5％和95.8％.与属于同-分支的HZJ16
本研究采用哈尔滨兽研所的AIV-H5 RT-PCR试剂盒以及FAOAIV-HI试剂作为禽流感的病原学与血清学监测,选择兽医工作基础较好的10个县的10个自然村作为监测采样点,对湖南省农村死鸡进行了连续5个月的禽流感感染的病原学动态监测.选择10个农村家养小型鸭场进行了禽流感的一次性病原学和血清学监测.在采集的1300对鸭喉和泄殖腔拭子中没有发现阳性样品,在203份鸭血清中,按1:16为阳性起点,H
本研究从鹅群中分离得到一株H5N1亚型禽流感病毒(AIV).首先设计合成两对HA和NA基因特异性引物,采用两步法RT-PCR,对鹅流感病毒株A/Goose/Hunan/0609/2002(H5N1)(简称GS/HN/0609/02)的表面蛋白基因进行序列测定,并与国内外已经发表H5N1亚型毒株表面蛋白基因进行序列分析和比较.结果表明HA和NA基因全长分别约为1.7Kb和1.4Kb,分离株与12个参
本研究选取H5、H9、H7亚型禽流感病毒血凝素基因保守序列,设计了各自亚型的特异性引物和Taqman MGB探针,利用实时荧光定量RT-PCR一步法建立了禽流感灭活疫苗的定型检测方法,该方法特异性好,对其他类疫苗无交叉反应,重复性佳.结果表明荧光定量PCR方法为禽流感灭活疫苗提供了一种特异、敏感、快速和简洁的鉴别检测方法.
自1997年香港首次报道人感染禽流感(H5N1)以来,国人对禽流感已不再陌生.而2005年10月以来,禽流感再次在全世界范围内大流行,通过候鸟传播,波及亚、欧、美等15个国家.国内也有10多个省市陆续报道暴发禽流感,患病动物包括鸡、鸭、鹅、天鹅、火鸡、候鸟和其他飞鸟,同时不少省份报道有人感染禽流感,且人发病者死亡过半,绝大多数人闻之心惊色变.本文对禽流感进行了简要介绍,阐述了禽流感不可怕的理由,介
由于单克隆抗体具有良好的特异性,从而被广泛用于疫病的诊断.本研究中,制备得到一株禽流感病毒型特异性单克隆抗体A12B4.经鉴定,A12B4株单抗的免疫球蛋白亚类为轻链为κ链的IgM;针对H9、H7和H5亚型禽流感病毒的亲和力常数分别为3.17×1010、3.17×1010和5.5×1010经western-blotting和免疫荧光分析,证明该株单抗是NP蛋白特异性单克隆抗体.基于单抗的以上特性,
禽流感病毒(AIV)存在着广泛的抗原漂移和抗原转变现象,其中以血凝素(HA)基因的突变率最高,历史上所有的高致病性禽流感均是由H5和H7亚型AIV引起的虽然目前在我国还未有H7亚型AIV发病的报道,但做为技术储备建立针对H7亚型AIV的特异性诊断方法和研发防治用生物制品已成为当务之急.
本文对禽流感免疫抗体的消长变化进行了初步研究.将150只三黄鸡随机分为五组,用禽流感灭活油乳剂疫苗和禽流感灭活疫苗免疫试验组三黄鸡;M日龄时,对试验一、二、三、四组鸡进行首免,剂量为0.3mL/只;在35日龄时,对试验二、四组鸡进行二免,剂量为0.2mL/只;在21、28、35、42、49、56、63、70、77日龄采血,用血凝抑制(HI)试验测定各组三黄鸡血清中HI抗体效价;结果表明,禽流感灭活
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