【摘 要】
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伏马菌素(Fumonisins,FUM)是由镰孢菌产生的可对动物产生神经毒性如马脑白质软化等的双酯类真菌毒素.为了探明引起苜蓿根腐病的镰孢菌是否具有产伏马菌素的潜力,以便进一步分析可能造成苜蓿饲料中含有该毒素而对牲畜产生影响,本研究利用已报道的检测伏马菌素基因的引物FUM8 rp679/rp680,对分离自苜蓿根腐病症状样品上的具有致病性的镰孢菌进行DNA PCR扩增.rp679序列为5-CGTA
【机 构】
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中国农业大学植物保护学院,北京 100193
【出 处】
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中国植物保护学会2018年学术年会暨植保科技奖颁奖大会
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伏马菌素(Fumonisins,FUM)是由镰孢菌产生的可对动物产生神经毒性如马脑白质软化等的双酯类真菌毒素.为了探明引起苜蓿根腐病的镰孢菌是否具有产伏马菌素的潜力,以便进一步分析可能造成苜蓿饲料中含有该毒素而对牲畜产生影响,本研究利用已报道的检测伏马菌素基因的引物FUM8 rp679/rp680,对分离自苜蓿根腐病症状样品上的具有致病性的镰孢菌进行DNA PCR扩增.rp679序列为5-CGTAGTAGGAAT-GAGAAGGATG-3,rp680序列为5-GCAAGCTTTGTGGCTGATTGTC-3.PCR扩增采用20μl反应体系：10×PCR Buffer(Mg2+)2μl,dNTP Mix(各2.5mM)2.5μl,引物(10μMol/L)各1μl,rTaq DNA酶(5U/μl)0.2μl,DNA模板(100ng/μl)2μl,补ddH2O至终体积20μl.PCR扩增程序为：94℃预变性5min；94℃变性1min,56℃退火45s,72℃延伸1min,33个循环；72℃延伸10min,4℃保存.在上述条件下,鉴定为层出镰孢(Fusarium proliferatum)的菌株KLX2能够扩增出大小为922bp的条带,与目标片段大小相符,并将该片段测序结果与NCBI核酸序列数据库GenBank中已有序列进行BLAST比对分析,与Fusarium proliferatum(GenBank accession number： AY577451.1)Ident值达到99％,表明该菌株具有产伏马菌素的基因,与已报道层出镰孢具有产伏马菌素潜力的结果一致.本研究利用PCR技术可检测到所分离获得的苜蓿根腐病病原层出镰孢F.proliferatum菌株KLX2具有产伏马菌素的相关基因,说明该菌株具有产伏马菌素的潜力,但能否产生毒素,尚有待于经过毒素提取、纯化和检测进行验证.
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