目的：建立血浆和尿液中美托洛尔及其代谢产物α-羟基美托洛尔(HM)的反相高效液相色谱分析方法。 方法：采用zorbax SB-C18色谱柱，0.5 M KH2 PO4(用磷酸调节pH至3.5)-乙腈(80:20，V/V)为流动相，流速1.0 ml·min-1;荧光检测波长 Ex=216 mn,Em=312nm。 结果：血浆中美托洛尔的线性范围为 10-400ng.ml-1，HM的线性范围为5～360 ng·ml-1，低、中、高三种浓度绝对回收率均大于89％，相对回收率为94％～106％，日内和日间RSD均小于6％。尿液中美托洛尔的线性范围为50～4000 ng·ml-1，HM 的线性范围为25～3600 ng·ml-1，低、中、高三种浓度绝对回收率均大于77％，相对回收卒为94％～100％，日内和日间RSD均小于9％。血浆和尿液的稳定性实验结果差异均在±10％以内。 结论：本方法准确可靠、专一性好、操作简便，适用于临床药代动力学及药物基因组学研究。