采用两步法诱导人ES细胞分化为卵母细胞的研究

来源 :2016全国兽医学博士生论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qq330525312
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  用多能干细胞(PSC)通过体外诱导,获得雌性生殖细胞的研究已有报道,但是,其诱导时间较长(>45天),效率较低.本研究利用人PSCs,通过两步诱导法,将PSCs定向分化为雌性生殖细胞.首先,将多能干细胞培养在添加了卵泡液和生长因子的生殖细胞培养液中进行第一步诱导.10天后,细胞分化成原始生殖细胞样形态,表达DAZL、SOX 17和BLIMP1等生殖细胞的标记.为进一步获得卵母样细胞,将诱导得到的原始生殖细胞样细胞转移到含有激素和生长因子的卵母细胞培养液中,进行第二步诱导.经过7-10天,出现卵丘卵母细胞复合体结构,卵母样细胞直径在80-120μm左右,周边透明带清晰可见.同时,有部分卵母样细胞能自发成熟,出现胚胎样结构,并表达一系列卵母细胞标记.本研究建立的两步法诱导体系,能将hAFSCs、hESCs和hiPSCs等细胞分化为卵母样细胞,缩短了诱导周期(<20天),提高了诱导效率(>2%),为人类生殖细胞的研究和临床应用提供了新方法.
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