目的：西藏小型猪骨髓间充质干细胞的分离培养和纯化技术探讨。方法：对西藏小型猪分别进行骨髓获取、骨髓间充质干细胞分离、接种、培养以及传代。并测定骨髓间充质干细胞的生长活力。结果：利用密度梯度离心分离的原代细胞呈圆形且透明，接种后约fi小时开始贴壁，48-72小时开始变形，多数呈长梭形及多角形，且出现散在的集落样生长细胞，3-7d细胞数量迅速增多，部分呈漩涡状生长口第3代后细胞变得较为均质，到第10代细胞仍然生长状态良好。按照i：2-1：4传代，细胞密度大约为4x 104/cm2,可以5--7天传代一次，细胞生长快。MSCs复苏后进行台盼蓝染色，得到其复苏后存活率为85%；消化传代后(冻存前)MSCs进行台盼蓝染色，得其存活率为99%。说明冻存和复苏过程中，有部分细胞死亡，对细胞活力有一定影响。结论：本文获得的西藏小型猪MSCs复苏后的活力为85%，跟冻存前99%比较，有较大下降，说明冻存条件还有待改进。通过密度梯度离心法可以成功分离出西藏小型猪的MSCs；本方法获得的MSCs生长活力好，符合MSCs的基本生物学特性。