【摘 要】
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目的:西藏小型猪骨髓间充质干细胞的分离培养和纯化技术探讨。方法:对西藏小型猪分别进行骨髓获取、骨髓间充质干细胞分离、接种、培养以及传代。并测定骨髓间充质干细胞的生长活力。结果:利用密度梯度离心分离的原代细胞呈圆形且透明,接种后约fi小时开始贴壁,48-72小时开始变形,多数呈长梭形及多角形,且出现散在的集落样生长细胞,3-7d细胞数量迅速增多,部分呈漩涡状生长口第3代后细胞变得较为均质,到第10代
【机 构】
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广州医学院第二附属医院移植科广州 510260 广州医学院第二附属医院移植科广州 10260
【出 处】
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2011东莞第二届国际小型猪学术论坛暨大型实验动物生物医药研究应用研讨会
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目的:西藏小型猪骨髓间充质干细胞的分离培养和纯化技术探讨。方法:对西藏小型猪分别进行骨髓获取、骨髓间充质干细胞分离、接种、培养以及传代。并测定骨髓间充质干细胞的生长活力。结果:利用密度梯度离心分离的原代细胞呈圆形且透明,接种后约fi小时开始贴壁,48-72小时开始变形,多数呈长梭形及多角形,且出现散在的集落样生长细胞,3-7d细胞数量迅速增多,部分呈漩涡状生长口第3代后细胞变得较为均质,到第10代细胞仍然生长状态良好。按照i:2-1:4传代,细胞密度大约为4x 104/cm2,可以5--7天传代一次,细胞生长快。MSCs复苏后进行台盼蓝染色,得到其复苏后存活率为85%;消化传代后(冻存前)MSCs进行台盼蓝染色,得其存活率为99%。说明冻存和复苏过程中,有部分细胞死亡,对细胞活力有一定影响。结论:本文获得的西藏小型猪MSCs复苏后的活力为85%,跟冻存前99%比较,有较大下降,说明冻存条件还有待改进。通过密度梯度离心法可以成功分离出西藏小型猪的MSCs;本方法获得的MSCs生长活力好,符合MSCs的基本生物学特性。
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