【摘 要】
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目的:研究晚期氧化蛋白产物(AOPPs)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖和向成骨分化的影响及机制.方法:用全骨髓法提取大鼠MSCs,第3或第4代细胞用于实验;流式细胞术检测细胞表面标志物CD34、CD29,成脂、成骨诱导分化培养基诱导MSCs21天后,分别用油红O染色法检测细胞内脂滴形成,茜素红染色法检测钙化结节形成,综合鉴定MSCs;将细胞分为正常对照组(DMEM)、BSA对照组(DMEM
【机 构】
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广东省广州市南方医科大学珠江医院内分泌科 510280
【出 处】
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中华医学会第十二次全国内分泌学学术会议
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目的:研究晚期氧化蛋白产物(AOPPs)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖和向成骨分化的影响及机制.方法:用全骨髓法提取大鼠MSCs,第3或第4代细胞用于实验;流式细胞术检测细胞表面标志物CD34、CD29,成脂、成骨诱导分化培养基诱导MSCs21天后,分别用油红O染色法检测细胞内脂滴形成,茜素红染色法检测钙化结节形成,综合鉴定MSCs;将细胞分为正常对照组(DMEM)、BSA对照组(DMEM+BSA)和AOPPs干预组(AOPPs浓度为50、100、200、400μg/ml);用MTT法检测各组MSCs的增殖;对硝基苯磷酸盐(PNPP)法检测各组MSCs内碱性磷酸酶(ALP)活性;茜素红染色法检测各组钙化结节的形成;以2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)为荧光探针,通过荧光显微镜观察及流式细胞术检测各组MSCs内活性氧(ROS)水平;实时荧光定量PCR检测各组MSCs的ALP、Ⅰ型胶原蛋白、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)mRNA表达水平;Weston blot检测各组MSCs RAGE的蛋白表达水平.
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