利用玻璃化冷冻卵子获得临床妊娠的实验室思考

来源 :广东省医学会第五次生殖医学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:s5871212
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  目的 从实验室角度,报道移植5例利用玻璃化冷冻卵子全部获得临床妊娠(其中,两例活产)的病历.患者情况:平均不孕年限4.5年,女方平均年龄29.5岁,患者中男性因素不孕占为66.7%.由于取卵当天男方精液质量差、精液中无可利用精子等男方因素,将当天女方取到的卵子(MⅡ/MⅠ期)用玻璃化方法冷冻,然后在下一周期男方有可利用精子时利用复苏后卵子进行辅助生殖助孕.方法 卵子:女方,Gn平均起始用量150IU/L,Gn平均总天数11.3天,取卵日, 用玻璃化冷冻方法冷冻卵子 ,室温下,将卵子在含有HEPES的操作液中孵育1min,然后在预平衡液中孵育卵子, 最后在玻璃化溶液中快速处理. 女方自然周期或激素替代周期下,排卵日解冻卵子,将卵子放在解冻液中37℃下迅速复温,然后室温下,将卵子放在蔗糖浓度较低的溶液中, 并放在含HEPES的操作液中洗涤,最后放在培养液中培养,等待ICSI.精子:女方自然周期,排卵日,男方取精,获得可利用精子.实验室操作:女方排卵日,将复苏的卵子和男方精子行ICSI授精后培养,D1至D3观察胚胎,卵裂期进行移植.移植后剩余正常胚胎达到冷冻标准后冷冻.结果 促排卵周期获卵92个,冷冻80个卵子(MⅡ期及少量MⅠ期卵子);6例病例在自然周期下,共复苏80个卵子,存活47介,全部行ICSI授精;D1天,总受精数为34个,2PN数为33个;D3天,总卵裂数为33个,2PN胚胎为32个,其中6细胞以上为18个.1例因胚胎质量差取消移植,5例行卵裂期移植,平均移植数为2个.B超提示移植的5例中5例临床妊娠,其中:3例活产,1例妊娠中,1例宫内外合并妊娠.本中心移植的来源冷冻卵子的病例中,患者卵子总复苏率为58.8%,总受精率为72.3%,2PN率为70.02%,总卵裂率为97.1%,2PN胚胎卵裂率为97%,优胚率为54.4%,种植率为80%,最终均临床妊娠.与PotdarN和Nardo LG;等人用meta-分析数据相比较(2014,Reproductive BioMedicine Online),2PN率(74%)、D3优胚率(48.1%)和D3卵裂率(10o%)相似,和卵子复苏率(88%)较低,而临床妊娠率(28.8%)较高.结论 本中心移植的5例来自自身卵子的病例都获得临床妊娠,因此,可以利用玻璃化冷冻技术冷冻卵子,进而达到生殖力保存和解决取卵当天男方取精困难、没有精子的问题.本中心用玻璃化的方法冷冻卵子,可以获得较高的2PN率、优胚率和卵裂率,但是卵子复苏率与文献报道还有差距,可能与卵子冷冻时机有关,卵子均在取卵当天下午确认男方没有精子才冷冻,卵子冷冻时机还需要进一步探讨.
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