【摘 要】
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应用RT-PCR方法从鸡脑中扩增血管活性肠肽(VIP)基因片段,将其连接于pGM-T easy质粒,经过转化大肠杆菌、挑取阳性克隆和测序鉴定,确定为目的VIP基因片段.分别利用pGM-T easy质
【机 构】
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南京农业大学动物医学院,南京,210095
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十四次学术研讨会
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应用RT-PCR方法从鸡脑中扩增血管活性肠肽(VIP)基因片段,将其连接于pGM-T easy质粒,经过转化大肠杆菌、挑取阳性克隆和测序鉴定,确定为目的VIP基因片段.分别利用pGM-T easy质粒中T7和SP6启动子及其RNA聚合酶,以线性化的VIP/pGM-T easy为模板转录合成正、反义DIG标记RNA探针.通过原位杂交方法将合成的探针用于探查VIP-mRNA在鸡肠Remak神经(INR)中的分布情况.结果表明,INR的神经元胞体中有VIP-mRNA的转录,且这种神经元数量众多,原位杂交阳性神经元胞体大部分是大型神经元细胞,呈圆形或椭圆形;阳性神经元胞体在INR神经节中呈层状或成群分布.INR有神经纤维呈弱阳性.在节间束也有少量的阳性细胞分布.本文从基因水平证明INR中有VIP神经元.
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