鲨鱼软骨素对成骨细胞增殖及活性的影响

来源 :中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jwyzfh
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  目的 探讨最适浓度的鲨鱼软骨素对鼠成骨细胞增殖分化及成骨活性的影响,从而了解鲨鱼软骨素应用于骨组织工程的前景;方法 从出生时间小于24h的SD大鼠颅骨中分离培养原代成骨细胞,并将其传代到第三代作为加药实验的种子细胞,通过初筛获得鲨鱼软骨素IC50,以正常DMEM培养基作为对照组,将鲨鱼软骨素配比成7个浓度实验组(1μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、25μg/ml、40μg/ml、50μg/ml),MTT法测定成骨细胞24小时、48小时、72小时各浓度组细胞增殖情况;碱性磷酸酶试剂盒法测定24小时、48小时、72小时各浓度组成骨细胞裂解后上清液中碱性磷酸酶活性;对各加药组成骨细胞14天后的矿化结节进行茜素红染色并在低倍镜下进行计数,比较各浓度组的矿化速率情况; 结果 ①MTT法得到1μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml的鲨鱼软骨素在24、48、72小时能促进成骨细胞的增殖,其中2.5μg/ml的鲨鱼软骨素组OD值最大,相比于对照组存在明显差异(P<0.05),具有统计学意义;②碱性磷酸酶试剂盒实验组显示2.5μg/ml实验组在48、72成骨活性最高,相比于对照组有显著的差异性(P<0.05),而在24小时稍高于对照组,无显著的差异性(P>0.05),不具有统计学意义;③茜素红染色低倍镜下矿化结节计数的结果显示:2.5μg/ml鲨鱼软骨素实验组的矿化结节数量在两周后最高,相比于对照组有显著差异性(P<0.05).
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