大鼠骨髓间充质干细胞exosome对自身心肌分化及抗凋亡实验研究

来源 :中华医学会第十五次全国心血管病学大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guoshun9231
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目的:研究经5-氮杂胞苷(5-aza)诱导或低氧培养后,骨髓间充质干细胞(Bone marrow Mesenchymalstem cells,BM-MSCs)分泌的外泌体(exosome)对间充质干细胞向心肌细胞分化或抗凋亡能力的影响,并探讨exosome发挥心肌保护作用的机制。方法:取6周龄SD大鼠的胫骨及股骨分离骨髓间充质干细胞,用全骨髓差异贴壁法培养及纯化间充质干细胞,并取第6代MSCs用于实验,分别提取正常培养的BM-MSCs分泌的exosome,低氧培养的BM-MSCs分泌的exosome及5-aza诱导的BM-MSCs分泌的exosome用于体外研究。结果:(1) hypoEX组与BM-MEX组及阳性对照组相比,心肌细胞凋亡率均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);而BM-MEX组与阳性对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)心肌细胞的a-actin,Desmin,cTnT,GATA-4,Nkx2.5基因表达量均远远高于5-azaEX组及BM-MEX组,差异有统计学意义(P<0.05);5-azaEX组细胞的上述5种基因表达量均稍高B M-MEX组,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)低氧培养的BM-MSCs所分泌的exosome能在体外减少缺氧环境下心肌细胞的凋亡率;而未经低氧处理的则不能降低心肌细胞凋亡率。(2)5-aza诱导的BM-MSCs所分泌的exosome未能促进BM-MSCs向成熟心肌细胞分化;但其cTnT,desmin,a-actin,GATA4及Nkx2.5的基因表达量较BM-MEX组有增多的趋势,BM-MSCs培养过程中持续加入5-aza诱导的exosome或可出现统计学意义。
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