光毒性,即暴露于紫外光条件下化学物质对皮肤的造成的毒性反应,是化妆品安全评估中重要的毒理学评估终点之一。传统的光毒性测试用动物作为受试对象,包括白色家兔或白化豚鼠模型以及小鼠耳部肿胀试验(Mouse:Ear Swelling Test)。在过去的10年乃至20年,欧盟开始禁止化妆品成品的动物实验(2004年起)直至今日全面禁止任何类型的化妆品成品及其成分的动物实验(2013年),动物替代试验方法包括光毒性的方法得到了长足的发展。最早验证且被普遍接受的光毒性替代试验为3T3 Neutral Red Uptake Phototoxicity Te—st(3T3NRU PT),用于比较在光照和非光照条件下化学物质对3T3细胞的毒性损害。3T3NRU PT对于光毒性的检测比较准确,但由于其测试条件局限于水溶性化学物质或化妆品原料,该替代试验在很多化妆品成品的光毒性的检测应用受到限制。而另一种动物替代模型,模拟人体皮肤的3D人造皮肤模型(EpiSkin(?)human skin model)则能克服这种局限性,可满足不同化妆品原料及成品的光毒性检测需求。EpiSkin作为替代试验用于皮肤刺激性检测已经得到欧洲及美国权威试验方法验证机构如欧洲替代方法验证中心(ECVAM Scientific Advis—ory Committee,1998及2009)和美国替代方法的验证协调委员会:Interagency Coordinating Committee on the Validation of Alternative Methods(ICCVAM,2002)认证,并获得世界经济合作与发展组织(OECD TG 431,2004;2013修正版)认可。已有数据显示3D人造皮肤模型与3T3NRU PT对化学物质在光毒性上的筛查具有等同效能。近年来,欧莱雅公司建立了应用EpiSkin(?)模型对含有潜在光毒性原材料的化妆品进行光毒性测试的方法(PhotoEpiskin)。该方法是将受试化妆品原料或成品应用于人造皮肤模型上,比较受试物在非光照以及光照条件下的细胞毒性(细胞存活能力)。试验中应用氯丙嗪作为阳性对照和无受试物的阴性对照,以确保合适的光照强度,使得光照本身不造成细胞毒性而又足够诱发光毒反应。波长范围包括可见光及UVA(滤过UVB),强度为20J/cm~2。细胞的存活能力通过噻唑蓝(MTT)比色法计算得到。在试验中排除受试物的自发染色性及其与MTT的反应性。光毒性评价标准为受试物在光照条件下与非光照条件下细胞存活率的差异大于30%。基于欧莱雅公司对大量具有潜在光毒性产品进行筛查得出的数据,我们认为PhotoEpiskin是一种有效的光毒性检测筛查方法,对光刺激性的检测简单有效,可用于化妆品光毒性早期筛查及选取合适的原材料及其添加浓度。PhotoEpiskin在应用于化学物质光敏性的检测时则需同时结合化学物质本身的致敏性,光敏性替代试验或人体测试数据进行全面评估。