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研究目的:为获得高表达且特异性强的纳米抗体,我们利用噬菌体展示技术,构建抗BVDV纳米抗体基因文库,并从中筛选出特异结合BVDV 的纳米抗体进而对其进行表达和抗病毒能力的功能验证,为防治BVDV 奠定基础。材料与方法:(1)BVDV 纳米抗体基因文库的库容量和多样性鉴定。本实验对已构建的文库库容量进行鉴定,采用菌液PCR 对抗体文库的重组率进行检测、多样性分析。(2)BVDV 纳米抗体文库的筛选和克隆鉴定。利用M13K07 辅助噬菌体对基因文库拯救得到噬菌体展示文库,测定其滴度。以BVDV 全病毒作为目标抗原,将其结合于固相上,加入噬菌体展示文库,经三轮“吸附-洗脱-扩增”亲和筛选后,随机挑取单克隆进行ELISA 检测。