论文部分内容阅读
目的：MYCN基因的超量表达在神经母细胞瘤预示高度恶性，预后不良。本实验制备以氨基脂为主要成分、叶酸受体为靶向的脂质体包裹MYCN基因小干扰性RNA，研究其体外、体内对神经母细胞瘤LA-N-5细胞MYCN基因表达的抑制及细胞增殖的影响。
方法：制备氨基脂为主要成分、叶酸受体为靶向的脂质体包裹cy3标记的MYCNsLRNA转染LA—N-5细胞，以每lag蛋白中荧光强度半定量siRNA的转染效果；用定量RT-PCR检测转染前后MYCN基因mRNA变化；MTT法检测细胞增殖受抑情况；建立皮下种植瘤动物模型，分叶酸受体为靶向的脂质体包裹MYCNsLRNA组、无包裹MYCNsiRNA组和空白对照组，腹腔注射MYCNsiRNA 125μg/kg/d×5天，对照组注射生理盐水，末次注射后24小时处死动物，测肿瘤体积并取肿瘤组织提取总RNA，实时定量RT-PCR测定瘤组织MYCN基因mRNA变化。
结果：叶酸受体为靶向脂质体介导MYCNsiRNA以100nmol/L终浓度转染LA-N-5细胞后每μg蛋白含siRNA 1808.5±140.2pg，作用72小时MYCN基因mRNA表达显著下降，抑制率79.2％，瘤细胞增殖受抑达66.2％；叶酸受体为靶向脂质体SCID鼠体内介导MYCNsiRNA对神经母细胞瘤组织MYCNmRNA表达抑制率53.1％，对肿瘤生长抑制率为48.7％。
结论：叶酸受体为靶向脂质体介导MYCNsLRNA在体外及体内均对LA-N-5细胞MYCNmRNA表达有显著抑制作用，明显抑制LA-N-5细胞增殖，为神经母细胞瘤靶向治疗、基因治疗开辟了新的思路。