【摘 要】
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本研究以MTHFR基因的C677T位点为研究对象,建立了一种基于错配杂交及酶联免疫法检测的突变分析新方法.首先用5端标记有生物素的引物扩增一段长度为115bp的包含有C677T位点的DNA片段,针对C677T位点合成两条分别与野生型及突变型序列完全互补的且标记有地高辛的寡核苷酸探针,将两条探针分别与PCR产物杂交,杂交体被链霉亲和素包被的酶标板捕获,然后加入酶标抗体底物,显色并检测其相对吸光度,通
【机 构】
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430064,武汉,湖北中医学院医学检验与技术系紫阳校区 430030,武汉,华中科技大学同济医学
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本研究以MTHFR基因的C677T位点为研究对象,建立了一种基于错配杂交及酶联免疫法检测的突变分析新方法.首先用5端标记有生物素的引物扩增一段长度为115bp的包含有C677T位点的DNA片段,针对C677T位点合成两条分别与野生型及突变型序列完全互补的且标记有地高辛的寡核苷酸探针,将两条探针分别与PCR产物杂交,杂交体被链霉亲和素包被的酶标板捕获,然后加入酶标抗体底物,显色并检测其相对吸光度,通过计算两条探针的吸光度值之比,即可确定样品的基因型.
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