目的:开发出定性检测人血清或血浆中寨卡病毒IgM抗体的快速检测试剂盒。方法:将经过DNA分析和蛋白结构分析确认的蛋白序列对应的DNA序列进行合成,引入Nde I和Xho I酶切位点,以商品化p ET30 a质粒为基础载体,构建p ET30a-zikv E寨卡病毒表达载体,转入BL21(de3)大肠杆菌株。表达的蛋白C端带HIS标签,通过亲和层析纯化和蛋白复性,得到寨卡病毒膜蛋白。采用胶体金免疫层析技术,在玻璃纤维纸上包被金标记寨卡病毒膜蛋白和金标记鼠IgG,在硝酸纤维膜检测线和对照线处分别包被抗人μ链和兔抗鼠IgG抗体,制备寨卡病毒IgM抗体检测试剂盒(胶体金法)。对研制的试剂盒进行性能评价,用研制的寨卡病毒IgM抗体检测试剂盒(胶体金法)与Zika Virus IgG/IgM Ab Rapid Test同时检测500份体检人员血清。同时,德诺杰亿(北京)生物科技有限公司委托中国医学科学院医学实验动物研究所制备抗寨卡血清建立企业参考品对该试剂进行质控控制和评价,与中国食品药品检定研究院合作建立寨卡病毒IgM抗体检测试剂(胶体金法)国家参考品。研究结果:得到的寨卡病毒膜蛋白免疫原性好,特异性强,可用于制备寨卡病毒检测试剂盒。研制出的寨卡病毒IgM抗体检测试剂盒(胶体金法)在15-20分钟内得出检测结果,37度储存7天试剂盒稳定,与国外商品试剂盒同时检测500份体检人员血清,寨卡病毒IgM抗体阴阳性符合率100%。研究结论:研制的试剂盒有较好的特异性和敏感性,可用于定性检测人血清或血浆中存在的寨卡病毒IgM抗体,从而辅助诊断寨卡病毒感染。