【摘 要】
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目的：骨骼肌损伤是严重车祸、肌肉外伤、冻伤、战地伤等临床医学和运动医学领域中的一种常见疾患,骨骼肌损伤修复不良严重影响人们的日常生活和工作,如何促进骨骼肌修复是一个亟待解决的重要问题.调节性T(Treg)细胞是一类调节免疫反应的重要淋巴细胞亚群,传统上认为这类Foxp3+CD4+T细胞在体内主要发挥抑制免疫应答的功能.最近有文献报道在小鼠骨骼肌损伤局部发现有组织特异性Treg细胞聚集并参与骨骼肌修
【机 构】
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郑州大学第一附属医院生物细胞治疗中心,河南郑州450052 郑州大学第一附属医院胸外科
【出 处】
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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会
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目的：骨骼肌损伤是严重车祸、肌肉外伤、冻伤、战地伤等临床医学和运动医学领域中的一种常见疾患,骨骼肌损伤修复不良严重影响人们的日常生活和工作,如何促进骨骼肌修复是一个亟待解决的重要问题.调节性T(Treg)细胞是一类调节免疫反应的重要淋巴细胞亚群,传统上认为这类Foxp3+CD4+T细胞在体内主要发挥抑制免疫应答的功能.最近有文献报道在小鼠骨骼肌损伤局部发现有组织特异性Treg细胞聚集并参与骨骼肌修复的现象.本研究旨在探索Treg细胞在小鼠骨骼肌损伤中的作用及其相关机制,为骨骼肌损伤修复提供新的思路,并为再生医学提供新的治疗手段.方法：利用冻伤法构建小鼠骨骼肌急性损伤模型,并用胶原纤维染色(Masson三色染色法)鉴定肌肉损伤程度.在冻伤后不同时间,用流式细胞仪检测Treg细胞在受损肌肉中的比例；用免疫组化法检测受损肌肉中Treg细胞的浸润程度；用qRT-PCR法检测肌肉损伤部位Treg细胞特异性分子Foxp3和相关趋化因子(CCL3、CCL4、CCL5)、以及表皮生长因子家族的双调蛋白(Areg)、骨骼肌增殖分化基因MyoG等表达情况,并进行相关性分析.结果：Masson三色染色法显示成功建立了小鼠骨骼肌冻伤模型和评价体系.冻伤后不同时间在肌肉损伤局部均出现Treg细胞比率增加,其中第1天Treg细胞为(8.4±1.7)％,第2天为(12.1±2.3)％,第4天为(16.9±2.1)％,第7天为(13.1±1.9)％,第14天为(7.7±1.3)％,均较第0天对照组小鼠具有统计学差异(P＜0.05).免疫组化实验证实Treg细胞在肌肉损伤部位聚集.qRT-PCR结果显示损伤第4天Foxp3(P=0.0255)、CCL3 (P=0.0149)、CCL4 (P=0.0187)、CCL5 (P=0.0275)、Areg (P=0.0317)和MyoG(P=0.0166)在受损组织表达均增高.相关性分析提示Foxp3与Areg (P=0.0481)呈显著正相关,CCL3、CCL4、CCL5和MyoG也和Foxp3呈正相关.结论：本研究提示Treg细胞可能通过相关趋化因子募集到骨骼肌受损部位；Areg和MyoG等分子可能参与了Treg细胞介导的骨骼肌损伤修复,具体的分子机制正在研究中.
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