温阳化浊通络方对系统性硬化病成纤维细胞TGF-β1/Smad信号通路的影响

来源 :第七届国际中医风湿病学术大会暨中华中医药学会第十九届风湿病学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gengyuefeng009
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目的:探讨温阳化浊通络方含药血清对系统性硬化病(systemic sclerosis,SSc)皮肤成纤维细胞TGF-β1/Smad信号通路的影响. 方法:将36例SSc患者按随机数字表分为中药组、西药组和中西药组,每组12例,中药组予口服温阳化浊通络方汤剂,西药组予口服青霉胺片(每次0.1259,每日2次)和强的松片(每次20mg,每日1次),中西医组予口服青霉胺、强的松及温阳化浊通络方汤剂,治疗1个月制备含药血清.另取10例未治疗的SSc患者血清作为对照组.各组血清分别加入皮肤成纤维细胞培养体系中.Western blot法测定皮肤成纤维细胞TGF-β1Ⅰ型受体(TGF-β1 RⅠ)、TGF-β1Ⅱ型受体(TGF-β1 RⅡ)、p-Smad2/3及Smad7蛋白表达RT-PCR法检测SSc皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原(COL-Ⅰ、COL-Ⅲ)mRNA的表达,ELISA法测定SSc皮肤成纤维细胞培养上清液中MMP-9及TIMP-1含量. 结果:与对照组比较,西药组、中药组和中西药组SSc患者和健康人皮肤成纤维细胞TGF-β1 RⅠ、p-Smad2/3蛋白水平降低, Smad7蛋白水平升高(P<0.05,P<0.01),同时中西药组还降低TGF-β1 RⅡ蛋白表达(P<0.05,P<0.01);与西药组比较,中药组、中西药组TGF-β1 RⅠ、p-Smad2/3表达降低,中西药组Smad7表达升高(P<0.01).在SSc皮肤成纤维细胞中,西药组、中药组和中西药组COL-Ⅰ、COL-Ⅲ mRNA表达水平低于对照组(P<0.05,P<0.01),且中西药组COL-Ⅲ表达水平明显低于西药组(P<0.01).同时与对照组比较,西医药、中药组、中西药组MMP-9水平及MMP-9/TIMp-1比值明显升高(P<0.05,P<0.01),而中药组、中西药组TIMP-1表达水平降低(P<0.01);与西药组比较,中西药组MMP-9水平及MMP-9/TIMP-1比值升高,TIMP-1水平降低(P<0.05,P<0.01). 结论:温阳化浊通络方含药血清可能通过调控SSc皮肤成纤维细胞TGF-β1/Smad信号通路中关键分子——TGF-β1 RⅠ、p-Smad2/3、Smad7的表达,抑制TGF-β1/Smad信号通路传导,减少Ⅰ、Ⅲ型胶原表达.
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