功能性丁酸梭菌的分离、鉴定及发酵条件研究

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为了获得功能性丁酸梭菌,本研究从不同动物的粪便和进行丁酸梭菌的分离。首先对样品进行80℃水浴10min除去非芽孢菌后,然后接种到TSN选择培养基中进行菌株的分离与筛选,对分离到的不同菌株分别进行菌落形态、显微形态初步观察,.对形态疑似丁酸梭菌的菌株通过产酸能力检测获到一株产酸性能力较强的菌株C.B1,然后对C.B1进行生理生化鉴定和16S rDNA序列分析。以分离菌种C.B1为研究对象,对其发酵条件(培养基成分、接种条件、pH和培养温度等)进行了优化,并进一步研究了该菌株芽孢的形成条件。结果表明该菌属革兰氏阳性厌氧菌,菌体呈杆状,能形成圆形或椭圆形芽孢,菌体中部膨大呈梭形。16S rDNA序列测定结果与丁酸梭菌的同源性高达98%,确定该菌株为丁酸梭菌。优化后的培养基成分为:葡萄糖1.0%、蛋白胨1.0%、酵母膏0.5%、牛肉浸膏0.3%、NaCI 0.1%、MnSO4·H2O 0.02%、MgSO4·7H2O 0.06%、CaCl20.08%。初始pH为7.0,接种量5%,培养温度为37℃。在此条件下菌液浓度可达4.5×109CFU/mL,芽孢转化率达到95%。以上结果为提高丁酸梭菌产量和降低丁酸梭菌生产成本提供参考依据,也为进一步深入研究丁酸梭菌的生物学功能及丁酸梭菌的产业化提供了一定的理论基础。
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