使TcLr19感病的叶锈菌突变体的获得

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小麦TcLr19表现为全生育期抗性,在我国至今没有发现对TcLr19产生毒性的菌株,所以本研究拟利用EMS诱变获得使小麦TcLr19感病的叶锈菌PHNT毒性突变菌株。本研究以叶锈菌菌株PHNT为野生型实验材料,对其进行单孢分离并大量扩繁;首先将EMS设为0.005M、0.05M、0.01M及0.1M不同的浓度梯度,处理小麦叶锈菌新鲜夏孢子,并以未处理的孢子作为对照组,显微镜下观察孢子萌发率,选取萌发率为50%的EMS浓度大批量处理小麦叶锈菌新鲜夏孢子,并接种于小麦TcLr19;初步获得在TcLr19上感病的多个突变菌株,大量扩繁,接种于以Thatcher为遗传背景的近等基因系材料,并同时接种野生型菌株作为对照,进一步明确其发生突变的位点,若只有TcLr19的表型由抗病变成感病,而其它的近等基因系材料没有发生改变,即发生突变的位点为AvrLr19;。我们的研究结果表明用不同EMS浓度诱变小麦叶锈菌新鲜夏孢子,EMS浓度为0.005M时,孢子的萌发率为50%,浓度越高萌发率越低;通过EMS诱变我们获得了8株突变菌株,正在进行进一步验证。本研究为AvrLr19的克隆以及AvrLr19分子标记的开发奠定了良好的基础,同时为指导含Lr19的小麦提供理论指导作用。
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