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油松(Pinus tabulaeformis Carr.)是中国特有树种,也是我国北方最重要的森林树种之一,目前林业上所用的实生苗和优树嫁接的繁殖方法远不能满足生产的要求,组织培养对其无性快繁、优良林木生产和基因工程育种等具有重要意义.油松成熟胚培养诱导不定芽发生和植株再生的研究曾有过零星报道,但不定芽和不定根的发生率都很低,且报道结果难以重复.本文在前人研究基础上,以油松成熟合子胚为外植体进行离体培养,目的在于优化油松成熟胚培养不定芽和不定根诱导条件,通过直接器官发生途径建立稳定的油松植株再生系统.研究结果如下：(1)添加适当植物生长调节物质的MS 和DCR 培养基均能诱导油松不定芽发生,但DCR 培养基上不定芽诱导率显著高于MS,每个外植体上发生的不定芽数也多于MS.(2)在DCR 培养基中添加0,1,2,5 or 10 mg·L-1 2,4-D 与0,1,2,5 mg·L-1 BA的不同组合进行不定芽诱导,发现植物生长调节物质的种类和浓度对油松不定芽诱导具有显著影响(p＜0.05),只有添加BA的培养基才能诱导不定芽发生,而2,4-D对油松不定芽的形成具有抑制作用.当培养基中只添加1 mg·L-1 BA 时,不定芽诱导率最高,为90％,显著高于其它处理(p＜0.05).(3)及时将不定芽继代于不含植物生长调节物质的DCR 培养基上有利于芽的伸长.(4)生根培养选用添加一定浓度NAA 或IBA的1/2MS 和1/2DCR(标准基本培养基大量元素减半)培养基,结果发现不同培养基诱导生根效果不同.1/2MS 培养基上没有不定根发生,而NAA 更有利于促进愈伤组织的形成.不定根只发生于添加IBA的1/2DCR 培养基上.在添加1 mg·L-1 IBA的1/2DCR 培养基上不定根的诱导率最高,达到47.1％.(5)至少具有1 条长度达到3 cm 根的健康小植株炼苗容易成功.炼苗时,先将封口膜揭开,2-3 d 后将小植株移出来,小心洗去附着的培养基,栽植于灭菌蛭石,植株外面罩以塑料薄膜以保持湿度.2 周后,逐步撤去塑料薄膜,直至小植株完全暴露于自然条件下.再生植株在蛭石基质上炼苗后转到温室培养,2个月后成活率高达86.4％,且生长正常.通过优化研究建立了稳定的油松离体培养植株再生技术体系.即,以成熟胚为外植体,在添加30 g·L-1 蔗糖,1 mg·L-1 BA,6 g·L-1 琼脂的培养基上诱导培养4 周,转入相同成分新鲜培养基再培养4 周；将诱导的不定芽转入不含生长调节物质的DCR 培养基进行伸长培养,每4 周继代一次；2 cm 以上的不定芽在添加20 g·l-1 蔗糖,1 mg·L-1 IBA 和 6 g·L-1 琼脂的1/2DCR 培养基上诱导生根；再生植株瓶内炼苗3d 后移栽于灭菌蛭石中,期间注意环境条件的逐渐过渡,尤其是湿度的保持.用该体系经25 周培养,每粒种子可获得至少10 株再生苗.