【摘 要】
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目的 制备抗HIV-1基因工程抗原gp120单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯化并筛选能够配对检测基因重组gp120的单抗,并用之探索构建检测gp120的ELISA法,以期为研究HIV-1感染、检测、
【机 构】
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河北医科大学生物医学工程中心(河北石家庄)
【出 处】
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肿瘤免疫生物治疗国际研讨会暨河北省免疫学会第四届第一次学术年会
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目的 制备抗HIV-1基因工程抗原gp120单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯化并筛选能够配对检测基因重组gp120的单抗,并用之探索构建检测gp120的ELISA法,以期为研究HIV-1感染、检测、预防和治疗提供可用的单抗.方法 采用基因工程抗原gp120免疫BALB/c小鼠,传统杂交瘤技术制备抗基因重组gp120的McAb,ELISA法鉴定亚类和抗原结合特异性,选用IgG类单抗用SAS纯化并用HRP标记效价较高的纯化单抗,双抗体夹心ELISA法筛选配对单抗,并确定配对单抗检测基因重组gp120的灵敏度.结果 成功筛选出10株稳定分泌抗gp120单克隆抗体的杂交瘤细胞株,9株为IgC.其中6H9和9H12可以配对检测gp120抗原.结论6H9和9H12采用双抗体夹心法配对检测gp120抗原的灵敏度是10ng/ml.
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