地龙免疫活性肽有效成分的分离纯化及其理化性质的研究

来源 :第三届东北三省暨内蒙古自治区免疫学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:m3p0308
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  [目的]选择分离纯化低分子量地龙肽活性组分的最适方法及条件,确定其发挥免疫活性作用的有效组分.[方法]经超滤、丙酮沉淀、阴离子交换层析、凝胶过滤层析分离纯化地龙肽.Tricine-SDS-PAGE测定地龙肽分子量;高碘酸-Schiff法检测糖蛋白;脱E受体法及微溶血实验检测地龙肽活性和生物毒性.[结果11.截流分子量在3~10KD的地龙肽组分通过2倍体积冷丙酮沉淀可获得最大回收率;DEAE SepharoseTM Fast Flow作为离子交换剂可获得最佳分离效果;对上述洗脱峰成分进行Sephadex30pg凝胶过滤层析,获得一个高尖峰;Tricine-SDS-PAGE小分子肽电泳法测得其分子量约为10.764KD;高碘酸-Schiff法确定其不含糖成分.2.在一定浓度(2.065-41.300mg/ml)范围内,随着地龙肽浓度的升高E花环形成率逐步升高,且有较好的量效关系;微溶血实验显示其无溶解红细胞作用.3.45℃水浴30min,地龙肽组分的热稳定性较好;胃蛋白酶和胰酶与地龙肽的质量比为1∶20,37℃水浴1h,地龙肽组分耐受胃蛋白酶和胰酶的效果明显.[结论] 1.分子量约为10.764KD地龙肽单一组分具有较强的免疫调节活性.2.该组分无生物毒性,有较好的热稳定性和一定的耐受胃蛋白酶和胰酶的消化作用.
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