论文部分内容阅读
目的：察钛合金表面纳米羟基磷灰石/丝素蛋白复合涂层修饰对成骨细胞粘附的影响.方法：利用静电雾化喷涂技术在钛合金底物(Ti-6AI-4V)表面构建了纳米羟基磷灰石/丝素蛋白复合涂层.将成骨细胞MC3T3-E1分别与表面光滑的钛合金、表面纳米化的钛合金、单纯纳米羟基磷灰石涂层修饰及表面复合涂层修饰的钛合金共同培养,一定时间后用细胞计数及扫描电镜观察等技术进行比较.结果：1、纳米羟基磷灰石/丝素蛋白悬浮液的制备及表征.应用共沉淀法制备了nHA/SF悬浮液,利用扫描电镜、傅立叶转换红外光谱、能谱分析、X线衍射、热重分析等进行表征.制备的悬浮液中HA晶体的直径在20-30nm左右,长度约200-500nm,悬浮液中SF的含量在30％左右,两者之间以化学键合的方式构成了稳定的悬浮液.2、通过调节静电雾化技术的参数如悬浮液浓度、悬浮液流速、电场电压、底物与喷嘴距离等制备了均匀、无明显裂缝的复合涂层结构.扫描电镜及透射电镜显示涂层中羟基磷灰石晶体呈棒状,直径在40nm左右,长度在150nm左右,涂层两种成分结合紧密.3、Hoechst 33342染色、计数及分析：随着时间的延长四种材料上粘附的细胞均明显增加(P＜0.01).在1、3、7天3个同一时间段,粘附的成骨细胞数nHA/SF涂层＞nHA涂层组＞纳米化＞光滑(P＜0.01),由此可见,成骨细胞在复合涂层表面的早期粘附效果最好.4、电镜观察：成骨细胞与材料共培养1天、3天、7天时四种不同钛合金表面的成骨细胞数量nHA/SF涂层＞nHA涂层组＞纳米化＞光滑.较其他三种材料表面,在复合涂层表面成骨细胞伸展面积更大,具有较多突起.结论：1、利用共同沉淀法可以制备稳定的nHA/SF悬浮液,并且推测丝素蛋白可以定向诱导羟基磷灰石晶体的生长.2、通过对钛合金表面进行纳米羟基磷灰石/丝素蛋白复合涂层修饰可以明显促进成骨细胞的早期粘附,为下一步成骨细胞在植入物表面的新骨再生奠定了重要的基础.这提示我们可以通过钛合金表面行纳米羟基磷灰石/丝素蛋白复合涂层修饰来提高其骨整合性能.