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背景与目的:干细胞因子(stem cellfactor,SCF)是一种重要的造血生长因子,与其受体c-Kit特异性结合后,诱导c-Kit二聚化或寡聚化,介导细胞内信号传导,参与造血干细胞增殖、分化、迁移等生物活性。近年来研究发现SCF/c-kit信号通路参与血管再生,而血管再生有助于神经保护及神经再生,间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植治疗脑梗死中的血管再生相关分子机制备受关注,本研究将探讨SCF/c-kit信号通路在间充质干细胞移植治疗脑梗死(大脑中动脉闭塞)后血管再生的作用机制。方法:(1)体外实验:体外培养大鼠血管内皮细胞,予SCF及缺氧缺糖(OGD)处理,观察SCF对大鼠血管内皮细胞增殖的影响和抗OGD损伤作用;(2)体内实验:采用线栓法制作永久性大脑中动脉栓塞模型(MCAO),将动物实验分为空白对照组(对照组)、MCAO实验模型组(模型组)、MCAO实验模型+MSCs治疗组(MSCs组)和MCAO实验模型+MSCs治疗+c-kit慢病毒干扰组(慢病毒干扰组)。Westernblot及RT-PCR检测梗死灶周边SCF、c-kit的表达,并观察脑梗死面积、神经功能恢复、梗死灶周边微血管再生及血管再生相关蛋白(VEGF、bFGF、MMP-9、MMP-2)表达水平。结果:(1)体外培养大鼠血管内皮细胞,MTT检测细胞增殖:SCF剂量依赖性促进大鼠血管内皮细胞增殖,流式细胞仪技术检测凋亡:SCF预处理30分钟后OGD损伤组与直接OGD损伤组相比SCF抑制OGD损伤诱导的血管内皮细胞凋亡。(2)成功建立MCAO实验模型1、3、7、14天后,Westernblot及PCR结果提示模型组和MSCs组梗死灶周边组织SCF、c-kit和血管再生相关蛋白VEGF、bFGF、MMP-9、MMP-2表达与对照组相比增高,MSCs组较模型组增高更明显,而慢病毒干扰组SCF和c-kit呈不表达、血管再生相关蛋白表达低于对照组。大鼠神经症状评分结果显示MSCs组神经症状于治疗后3天逐步好转,表现为神经症状评分较模型组降低,但慢病毒干扰组神经症状评分较模型组高。用TTC染色检测脑组织梗死体积,结果显示与模型组相比,MSCs组梗死体积明显降低。而慢病毒干扰组梗死体积增高。乳胶灌注评估软脑膜表面的侧枝动脉代偿及荧光标记右旋糖苷脑灌注的方法显示梗死灶周边微血管再生。结果显示MSCs组的侧枝动脉代偿、梗死灶周边微血管再生显著高于模型组,而慢病毒感染组无侧枝动脉代偿及梗死灶周边微血管再生。结论:间充质干细胞移植治疗促进大脑中动脉闭塞周边脑组织SCF、c-kit表达,并通过SCF/c-kit信号通路促进血管内皮细胞增殖和促进血管再生蛋白分泌,进而促进血管再生。