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根据羊口疮病毒AH-GY13株B2L基因序列,设计特异性引物,两端分别添加BamHⅠ和XmaⅠ酶切位点.提取该毒株的DNA并以其为模板,扩增出B2L基因,再将该基因克隆至“自杀性”DNA疫苗载体pSCA1中,构建重组真核表达质粒pSCA-B2L.将该重组质粒转染BHK-21细胞,并通过间接免疫荧光实验(IFA)和Western blot验证B2L在体外的表达情况.IFA和Western blot结果表明B2L蛋白在体外能够正常表达,且具有良好的反应原性.本试验成功构建的真核表达质粒pSCA-B2L为进一步研制羊口疮病毒“自杀性”DNA疫苗奠定了基础.