钙信号转导在TOCP诱导SH-SY5Y细胞自噬中的作用

来源 :2015毒性测试替代方法与转化毒理学(国际)学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:outerwy
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  目的 为了更进一步了解三邻甲苯基磷酸酯(TOCP)的神经毒性和钙信号转导在TOCP诱导自噬中的作用,探讨泛素蛋白酶体系统在TOCP诱导自噬过程中的变化.方法 采用人成神经瘤母细胞SH-SY5Y为模型,全反式维甲酸诱导细胞分化,不同浓度的TOCP染毒未分化与分化的SH-SY5Y细胞6~72h,荧光分光光度计法测calpain活性、20S proteasome和26S proteasome的活性;采用钙通道阻滞剂20μM verapamil和100μM 2-APB预处理细胞15min后染毒1.0 mM TOCP 48h,荧光分光光度计法测calpain活性,western blot检测LC3Ⅱ/Ⅰ表达;不同浓度TOCP染毒SH-SY5Y细胞48h,western blot检测微管相关蛋白MAP-2、泛素结合蛋白p62和泛素化蛋白表达等.
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