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本研究采用分离着床前囊胚的内细胞团的方法培养黄牛类胚胎干细胞,通过对分离胚胎内细胞团方法和控制饲养层密度以及传代方法的培养条件的实验摸索,得出以下结论:使用器械分离法分离出囊胚内细胞团,使其贴壁在密度为80％的饲养层生长,传代培养时控制饲养层密度为40％,将器械传代法与酶消化传代方法结合进行传代能够较好的获得黄牛类胚胎干细胞.通过以上方法培养的第5代的黄牛类胚胎干细胞,具有典型的胚胎干细胞形态,经PCR鉴定和免疫组化鉴定证明其仍具有多能性,这为黄牛胚胎干细胞系的建立奠定了基础.