【摘 要】
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目前在进行体外激酶活性分析试验中,通常采用的方法主要包括同位素标记、荧光偏振法及特异性磷酸化抗体的使用。本文通过对细胞周期素依赖性蛋白激酶(CDK)2的活性检测,介
【机 构】
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中国医科大学教育部医学细胞生物学重点实验室,医学基因组学教研室,沈阳 110001
【出 处】
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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议
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目前在进行体外激酶活性分析试验中,通常采用的方法主要包括同位素标记、荧光偏振法及特异性磷酸化抗体的使用。本文通过对细胞周期素依赖性蛋白激酶(CDK)2的活性检测,介绍ATP定量试剂Kinase-Glo在体外激酶活性分析的应用,由HeLa细胞以免疫沉淀的方法纯化CDK2蛋白并进行体外激酶活性分析,观察在激酶活性分析反应体系中加入不同含量的CDK2时,Kinase-Glo试剂对CDK2激酶活性的变化；应用不同浓度CDK2抑制剂roscovitine孵育细胞,以Kinase-Glo试剂检测CDK2激酶活性的变化,从而探讨Kinase-Glo试剂进行激酶活性分析的灵敏性。结果表明,作为一种便捷敏感的试剂,Kinase-Glo可以应用于激酶活性分析及抑制剂反应条件优化过程。
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