小麦肉桂醇脱氢酶TaCAD1基因克隆表达分析及分子标记开发

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肉桂醇脱氢酶(Cinnamyl alcoholdehydrogenase,CAD)在木质素单体生物合成的下游反应中起关键作用,催化肉桂醛到肉桂醇的还原反应。植物CAD活性降低可能会导致木质素含量降低或者木质素含量不变但单体构成比例发生改变。为了深入研究小麦CAD基因的分子结构和表达模式,本文通过比对分析小麦TaCAD1 cDNA与其它近源种CAD基因序列,扩增出小麦CAD基因DNA序列全长,全长4233 bp,包括5’和3’非编码区、4个外显子和3个内含子,在该基因第4个外显子及部分3’非编码区开发了一个分子标记,检测258份自然群体,结果产生11种等位变异类型,并将其划分为四种带型。通过关联分析,这四种带型与2013年和2014年测定的小麦CAD活性和茎秆强度相关,该标记在一定程度上能区分小麦品种CAD活性的高低,可用于鉴别小麦不同品种茎秆强度。通过对自然群体中24份材料的小麦基部第二节间组织在花后5天、10天、15天、20天和25天的CAD基因表达量、CAD活性和茎秆强度数据分析表明:不同品种间茎秆强度变动趋势和CAD基因表达量变动趋势基本一致,均先增加后降低,而CAD活性除在前期略有波动外,整体呈现平稳上升趋势,为进一步研究小麦CAD基因的表达模式提供了依据。
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