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目的：观察长期低氧对骨肉瘤细胞的增殖、分化及骨肉瘤干细胞自我更新能力的影响。方法：2％氧浓度下培养MG63细胞2周，用MTT法观察低氧对骨肉瘸细胞增殖的影响：用RT-PCR检测低氧对骨肉瘤细胞成骨分化基因(RUNX2和BSP)及胚胎干细胞标志基因(OCT3/4和NANOG)表达的影响；低氧预处理MG63细胞，然后无血滑培养观察肉瘤球的形成率及球的大小；对8例骨肉瘤石蜡包埋标本进行免疫组织化学染色及免疫细胞化学检测骨肉瘤中HIF-1a及HIF-2a蛋白的表达。结果：长期低氧促进了骨肉瘤细胞的增殖。成骨分化基因Runx2和BSP的表达下调。而干细胞标志基因OCT3/4和NANOG表达上调，低氧预处理的骨肉瘸细胞其肉瘤球的形成率及大小均高十常规培养细胞。免疫组化证实骨肉瘤中有HIF-1a和HIF-2a蛋白的表达。结论：长期低氧促进了骨肉瘤细胞的增殖，抑制了骨肉瘤的成骨分化，并维持了骨肉瘤干细胞的干性，HIF-2a蛋白可能在骨肉瘤干细胞的维持中发挥了关键作用。