【摘 要】
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目的 自曹谊林教授97年在裸鼠体内构建出入耳廓形态软骨后,该技术至今一直未用于临床,其重要原因之一在于如何利用病人自体来源细胞构建组织工程人耳廓形态软骨。本课题拟探讨利用小耳症患者自体的残耳软骨细胞(MC)构建人耳廓形态软骨的可行性。方法 为获得足够数量的耳廓构建用种子细胞,我们首先通过克隆形成率、增殖曲线及细胞得率,考察MC在不同扩增体系下的增殖情况；为保证软骨形成质量,我们又考察了不同代次MC
【机 构】
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组织工程国家工程研究中心(上海国睿生命科技有限公司),上海200241 组织工程国家工程研究中心(
【出 处】
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第十一届全国再生医学(干细胞与组织工程)学术研讨会暨第七届全国组织工程与再生医学大会
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目的 自曹谊林教授97年在裸鼠体内构建出入耳廓形态软骨后,该技术至今一直未用于临床,其重要原因之一在于如何利用病人自体来源细胞构建组织工程人耳廓形态软骨。本课题拟探讨利用小耳症患者自体的残耳软骨细胞(MC)构建人耳廓形态软骨的可行性。方法 为获得足够数量的耳廓构建用种子细胞,我们首先通过克隆形成率、增殖曲线及细胞得率,考察MC在不同扩增体系下的增殖情况；为保证软骨形成质量,我们又考察了不同代次MC的成软骨能力,并优化了大规模扩增后的MC体外三维软骨构建体系；在上述基础上,尝试应用大规模扩增后的MC复合据羟基乙酸/聚乳酸(PGA/PLA)耳支架在体外构建人耳廓形态软骨,并开展裸鼠皮下移植评估。结论 我们发现,MC具有极强的增殖能力,扩增至第8代仍保持旺盛的增殖活性,提示能够获得足够数量的病人自体种子细胞构建耳廓形态软骨。然而,MC在扩增过程中极易去分化,扩增至第3代的细胞已基本丧失软骨形成能力。可喜的是,通过生长因子联合诱导,大规模扩增后去分化的MC能够重新获得软骨形成能力。最终,将大规模扩增后的MC复合PGA/PLA耳支架后,成功在体外构建出了人耳廓形态软骨,并且该软骨植入裸鼠皮下后仍能维持原有形态,且软骨表型稳定,不会发生骨化或纤维化。上述研究证实了利用大规模扩增的MC构建人耳廓形态软骨的可行性,对组织工程人耳廓形态软骨的临床转化具有重要推动作用。
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