【摘 要】
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目的：建立以睾酮为探针测定SD大鼠CYP3A1酶活性的简便,稳定,快速,重复性好的高效液相方法. 方法 以咪达唑仑为内标,采用Hypersil C18分析柱(5μm,250×4.6mm),以甲醇-10mM
【机 构】
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华南肿瘤学国家重点实验室,中山大学附属肿瘤医院,广州市510060
【出 处】
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2011年中国药学大会暨第11届中国药师周
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目的：建立以睾酮为探针测定SD大鼠CYP3A1酶活性的简便,稳定,快速,重复性好的高效液相方法. 方法 以咪达唑仑为内标,采用Hypersil C18分析柱(5μm,250×4.6mm),以甲醇-10mMNa2HPO4水溶液(pH8.25)-(60∶ 40,V/V)为流动相等梯度洗脱,在254nm波长、流速为1mL·min-1时检测样品.样品用乙酸乙酯萃取后,重溶进样,进样量为20uL. 结果在1.25～100ug·mL-1的范围内,6-β-羟基睾酮浓度与峰面积比的线性关系良好(r=0.9998),最低定量限为1.25ug ·mL-1；6-β-羟基睾酮的萃取回收率为83.9％～87.4％,RSD≤8.82％,相对回收率为100.4％～103.4％,RSD≤7.05％；平均日内、日间RSD均小于10％.样本萃取液放置24h以及样本室温放置4h,均稳定性良好. 结论本实验所建立的高效液相方法简单稳定,重现性好,适用于体外测定睾酮及其代谢物6-β-羟基睾酮,也可用于体外评估CYP3A1酶活性以及相关酶动力学研究.
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