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本研究应用分子生物学技术从App1、3型中扩增ApxⅣ的部分基因,并克隆到大肠杆菌中,经诱导体外高效表达了这种毒素,将表达产物作为抗原建立了间接ELISA,为App感染的血清学检测奠定了基础.
猪胸膜肺炎放线杆菌毒素IV基因体外表达与初步应用
【摘 要】
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本研究应用分子生物学技术从App1、3型中扩增ApxⅣ的部分基因,并克隆到大肠杆菌中,经诱导体外高效表达了这种毒素,将表达产物作为抗原建立了间接ELISA,为App感染的血清学检测奠定了基础.
【机 构】
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南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室(南京);江苏省农科院兽医所农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室(南京)
【出 处】
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第六次人畜共患病学术交流会
【发表日期】
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2004年6期
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利用PCR方法将W96株的SLT-Ⅱe B亚单位基因与其F18菌毛的优势粘附因子FedF亚单位基因以24nt的寡核苷酸连接,两亚单位均不含信号肽序列.将该合基因克隆到pUC19后测序列表明所有核苷酸序列均正确.亚克隆到pET28b后转入宿主菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测发现约44KD的目的蛋白主要以包涵体形式存在.用Ni亲和柱层析纯化到了相应分子量的蛋白质.
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