【摘 要】
：
目的 构建PNPLA3 I148M肝脏特异表达质粒,并在细胞水平进行表达验证.方法 根据NCBI上PNPLA3的已知序列,全基因合成PNPLA3基因的cDNA片段.利用PNPLA3的cDNA片段为模板,通过两轮PCR的点突变,构建出PNPLA3 I148M突变体,连接至表达载体,经转化、各挑选2个克隆、菌液培养和质粒抽提多步后,进行酶切验证,同时以野生型PNPLA3为阳性对照.
【机 构】
：
青岛市市立医院消化内二科;青岛市消化疾病重点实验室;中国海洋大学医药学院 青岛市市立医院消化内二科
【出 处】
：
中华医学会第十六次全国病毒性肝炎及肝病学术会议
论文部分内容阅读
目的 构建PNPLA3 I148M肝脏特异表达质粒,并在细胞水平进行表达验证.方法 根据NCBI上PNPLA3的已知序列,全基因合成PNPLA3基因的cDNA片段.利用PNPLA3的cDNA片段为模板,通过两轮PCR的点突变,构建出PNPLA3 I148M突变体,连接至表达载体,经转化、各挑选2个克隆、菌液培养和质粒抽提多步后,进行酶切验证,同时以野生型PNPLA3为阳性对照.
其他文献
Aim To investigate the relationship between infections by HBV genotype B or C strains with spontaneous YMDD mutations and the occurrence of hepatocellular cancer in HBV-related liver cirrhosis patient
目的 评价水飞蓟宾胶囊治疗脂肪性肝病的临床疗效及安全性.方法 脂肪性肝病患者148例,按2∶1比例随机入组试验组及对照组,试验组给予水飞蓟宾胶囊(水林佳)70mg,口服,每日三次,对照组给予多烯磷脂酰胆碱胶囊(易善复)456mg,口服,每日三次,两组疗程均为24周.观察2组患者治疗前后脂肪肝改善情况(主要包括临床症状评分、肝功能情况、血脂、腹部超声)和治疗过程中的不良反应.结果 试验组和对照组治疗
Objective The aims of this study were to identify the high risk factors of chronic hepatitis B (CHB) patients with a suboptimal response to ADV monotherapy, to assess the efficacy of a new therapeutic
Background & Aims The significance of circulating microRNA as a biomarker of cancer has been previously reported.However, there are few specific reports on the significance of circulating microRNA as
Aim To investigate the distribution and clinical sense of spontaneous YMDD mutation in HBV-related liver diseases.Materials and Methods A total of 1444 HBV-related liver diseases patients, including 1
Background/aims The aim of this study was to investigate the characteristics of tyrosine-methionine-aspartate-aspartate (YMDD) mutation and analyze the codon usage pattern of YMDD variants in patients
目的 NF-κB信号通路的负反馈抑制蛋白A20在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的研究未见报道,在体外研究提示A20参与代谢和炎症发生的基础上,探讨非酒精性脂肪性肝炎(NASH)动物模型中A20的表达情况及药物干预后对其表达的影响.方法 将28只6周龄、雄性C57/BL6小鼠随机分为对照组(8只)、蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)饮食组(10只)、多烯磷脂酰胆碱(PPC)干预组(10只),对照组给予普通
目的 探讨血清同型半胱氨酸和超敏C反应蛋白与烟雾病血管损伤的的相关性 方法 收集我院神经外科烟雾病患者250例,共250份烟雾病患者血清样本为病例组,病例组根据MRA影像结果 分为6期,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期为烟雾病发展早期,Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ期为烟雾病发展晚期,正常对照组250例,测定各组同型半胱氨酸和超敏C反应蛋白水平.结果 烟雾病组血清Hcy和hs-CRP水平明显高于对照组,差异有显著性.晚期与早期烟雾病患者
目的 白介素-22(Interleukin-22,IL-22)是IL-10细胞因子家族成员之一,主要由活化的Th细胞(Th1,Th17,Th22细胞)及固有免疫细胞(NK细胞,ILC细胞)分泌,作用于上皮细胞、角化细胞和肝细胞等.IL-22在肝组织中可发挥保护或致病作用.有研究显示,IL-22在小鼠酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)模型中发挥保护作用,然而其在人类
目的 构建基于PiggyBac转座子的无病毒参与的肝细胞永生化载体,并在HL-7702细胞中初步应用及验证,为进一步构建新型人源性永生化肝细胞株提供实验基础.方法 通过Gateway重组克隆技术BR反应和LR反应,以及酶切连接,构建基于PiggyBac的肝细胞永生化载体PB hTERT/E2A/eGFP/F2A/neo;将永生化载体与辅助载体pCAGG-PBase共转染HL-7702细胞,药物筛选