【摘 要】
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目的：建立无细胞百日咳疫苗血清学效价检测方法(PSPT)并与改良小鼠脑腔攻击法(MICA)相比较，对其适用性进行初步研究。 方法：采用离子交换、亲和层析等方法纯化出百日咳毒素(P
【机 构】
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北京天坛生物制品股份有限公司，北京 100024
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目的：建立无细胞百日咳疫苗血清学效价检测方法(PSPT)并与改良小鼠脑腔攻击法(MICA)相比较，对其适用性进行初步研究。
方法：采用离子交换、亲和层析等方法纯化出百日咳毒素(PT)和丝状血凝索(FHA)。用纯化抗原包被酶标板，以羊抗鼠IgG酶标抗体为指示抗体，建立检测小鼠抗PT抗体和抗FHA抗体的ELISA间接法，并对系统各项技术指标进行验证。在此基础上建立PSPT法，并与MICA法进行相关性分析。
结果：建立了小鼠抗PT抗体ELISA和抗FHA抗体ELISA，标准曲线线性范围内r≥0.99;经验证，两系统与无关抗体之间均无交叉反应;检测限度分别为93.75 mEU/ml和59.0625 mEU/ml，检测限量分别为100mEg/ml和70mEU/ml。建立了小鼠抗PT抗体PSPT和抗FHA抗体PSPT，将10批无细胞百日咳原液分别以PSPT法和MICA法进行效价测定，MI-CA法测定效价越高的原液，其诱导小鼠产生的抗PT抗体和抗FHA抗体滴度也越高，两者呈正相关关系，两种方法对原液合格与否的判定结果没有显著性差异(P>0.05)，且PSPT法比MICA法具有更好的重复性。
结论：抗PT抗体ELISA和抗FHA抗体ELLSA灵敏度高，准确度及精密度均较好，在此基础上建立起来的PSPT法有望替代MICA法用于检测无细胞百日咳疫苗的效价。
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