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目的:观察异甘草酸镁(MgIG)对大鼠肝细胞模拟缺血再灌注损伤的细胞凋亡影响及其机制.
方法:分离、培养、鉴定大鼠肝细胞,将对数生长期肝细胞,随机分为模拟缺血再灌注损伤模型组和MgIG低浓度组(0.1mg/ml)、中浓度组(1mg/ml)、高浓度组(10mg/ml)预处理24h后,模拟缺氧6h、复氧4h,进行以下实验观察:①应用光镜观察细胞的形态改变;②应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测MgIG对肝细胞活力的影响;③应用吖啶橙/嗅化乙啶(AO/EB)染色观察细胞的凋亡情况,计算细胞凋亡率;④应用RT-qPCR法检测各组各组bcl-2、Bax基因的表达量.对所得数据用SPSS17.0软件进分析,两样本均数比较采用t检验,多个样本的比较采用单因素方差分析.
结果:①MTT法结果表明,与模型组比较,一定浓度的MgIG(0.1、1、10 mg/ml)能提高缺氧-复氧损伤的肝细胞A值(0.285±0.017、0.320±0.008、0.341±0.019),差异有统计学意义(P＜0.01);②AO/EB染色结果显示,低、中、高浓度组细胞凋亡率(0.5763±0.0405、0.2866±0.0619、0.1261±0.0439)分别低于对照组(0.7124±0.0581),差异有统计学意义(P＜0.05);③RT-qPCR结果显示低、中、高浓度组bcl-2基因mRNA的表达量(3.350±0.151、9.279±0.350、15.290±0.756)分别高于对照组(0.928±0.068),差异有统计学意义(P＜0.01),低、中、高浓度组Bax mRNA的表达量(0.743±0.035、0.265±0.065、0.119±0.019)低于对照组(0.945±0.063)差异有统计学意义(P＜0.01).
结论:MgIG能提高缺血再灌注损伤的肝细胞活力和降低肝细胞凋亡,作用机制可能通过提高bcl-2的mRNA表达、降低bax mRNA的表达有关.