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内耳干细胞是一类具有自我更新能力的多潜能细胞，在一定条件下可以经诱导分化成毛细胞，但是内耳干细胞通过何种途径产生毛细胞仍然不明确。我们通过激光共聚焦显微镜结合活细胞培养小室构建实时扫描系统，动态观察内耳干细胞的分裂及分化过程。选用math1-GFP小鼠内耳干细胞体外原代贴壁培养，通过激光共聚焦显微镜观察发现内耳干细胞通过对称性分裂的方式产生两个干细胞(GFP-)，也发现内耳干细胞可通过不对称性分裂方式产生一个干细胞(GFP-)和一个毛细胞(GFP+)的细胞。此种结合激光共聚焦显微镜的实时动态观察技术可以为研究干细胞的分裂与分化提供直接依据。